Waters氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒的維護(hù)和使用
I. 簡介
制藥及食品和飼料行業(yè)中的許多應(yīng)用都需要進(jìn)行氨基酸分析。沃特世提供多款游離氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品，用于氨基酸的定性和定量測(cè)定、方法開發(fā)以及AccQ•Tag™ Ultra或AccQ•Tag方法的故障排查。本維護(hù)和使用手冊(cè)詳細(xì)說明了上述標(biāo)準(zhǔn)品的使用方法。
本產(chǎn)品僅供研究使用，無法用于診斷。
II. 復(fù)溶指南
配合紫外或熒光檢測(cè)儀器常規(guī)使用時(shí)，復(fù)溶方法如下：
說明 | 推薦供應(yīng)商 |
0.1 M HCl | 推薦使用LC-MS級(jí)HCl （Honeywell Fluka 35335或類似試劑） |
細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒（P/N：186009300）
1. 取1.2 mL 0.1 M HCl，加入17種水解氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品（藍(lán)色樣品瓶）中，每種氨基酸的濃度均為1000μM（胱氨酸除外，其濃度為500μM）。渦旋混合10 s。復(fù)溶后冷凍保存，標(biāo)準(zhǔn)品可穩(wěn)定存放60天。
2. 取250μL 0.1 M HCl，加入細(xì)胞培養(yǎng)補(bǔ)充氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品（白色樣品瓶）中，每種氨基酸濃度均為1000μM。渦旋混合10 s。復(fù)溶后冷凍保存，標(biāo)準(zhǔn)品可穩(wěn)定存放60天（谷氨酰胺僅可存放15天）。
3. 將250μL制備好的水解氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品加入細(xì)胞培養(yǎng)補(bǔ)充氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品樣品瓶中，得到500μL濃度為500μM的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液（胱氨酸除外，其濃度為250μM）。該溶液作為標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液，以建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。冷凍保存，該標(biāo)準(zhǔn)品可穩(wěn)定存放60天（谷氨酰胺僅可存放15天）。
注：如果發(fā)現(xiàn)隔墊上有固態(tài)標(biāo)準(zhǔn)品，請(qǐng)?jiān)谛郎u混合時(shí)翻轉(zhuǎn)樣品瓶，確保所有粉末均溶解。
食品和飼料標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒（P/N：186009299）
1. 取1.2 mL 0.1 M HCl，加入17種水解氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品（藍(lán)色樣品瓶 ）中，每種氨基酸的濃度均為1000μM（胱氨酸除外，其濃度為500μM）。渦旋混合10 s。復(fù)溶后冷凍保存，標(biāo)準(zhǔn)品可穩(wěn)定存放60天。
2. 取250μL 0.1 M HCl，加入食品和飼料補(bǔ)充氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品（綠色樣品瓶 ）中，濃度均為1000μM。渦旋混合10 s。復(fù)溶后冷凍保存，標(biāo)準(zhǔn)品可穩(wěn)定存放60天。
3. 將250μL制備好的水解氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品加入食品和飼料補(bǔ)充氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品樣品瓶中，得到500μL濃度為500μM的氨基酸溶液（胱氨酸除外，其濃度為250μM）。該溶液作為標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液，以建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果復(fù)溶后冷凍保存，標(biāo)準(zhǔn)品可穩(wěn)定存放60天。
注：如果發(fā)現(xiàn)隔墊上有固態(tài)標(biāo)準(zhǔn)品，請(qǐng)?jiān)谛郎u混合時(shí)翻轉(zhuǎn)樣品瓶，確保所有粉末均已溶解。
校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品制備示例
采用如下稀釋方案創(chuàng)建校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品系列。這將作為創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線的初始校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液。
1. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品7：500μM（胱氨酸250μM）- 50μg/mL（胱氨酸25μg/mL）
首先將試劑盒內(nèi)的大樣品瓶和小樣品瓶復(fù)溶并合并，然后從裝有500 μL 500 μM 26種氨基酸（細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)品）或21種氨基酸（食品和飼料標(biāo)準(zhǔn)品）的樣品瓶開始操作。
2. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品6：250 μM（胱氨酸125 μM）- 25 μg/mL（胱氨酸12.5 μg/mL）
取215 μL校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品7，加入校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品6樣品瓶中。加入215 μL 0.1 M HCl。混合。
3. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品5：100 μM（胱氨酸50 μM）- 10 μg/mL（胱氨酸5 μg/mL）
取150 μL校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品6，加入校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品5樣品瓶中。加入225 μL 0.1 M HCl?；旌?。
4. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品4：20 μM（胱氨酸10 μM）- 2 μg/mL（胱氨酸1 μg/mL）
取93 μL校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品5，加入校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品4樣品瓶中。加入372 μL 0.1 M HCl。混合。
5. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品3：10 μM（胱氨酸5 μM）- 1 μg/mL（胱氨酸0.5 μg/mL）
取182 μL校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品4，加入校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品3樣品瓶中。加入182 μL 0.1 M HCl?；旌?。
6. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品2：2.5 μM（胱氨酸1.25 μM）- 0.25 μg/mL（胱氨酸0.125 μg/mL）
取84 μL校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品3，加入校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品2樣品瓶中。加入252 μL 0.1 M HCl?；旌稀?/span>
7. 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品1：0.5 μM（胱氨酸0.25 μM）- 0.05 μg/mL（胱氨酸0.025 μg/mL）
取56 μL校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品2，加入校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品1樣品瓶中。加入224 μL 0.1 M HCl?；旌?。
正纈氨酸內(nèi)標(biāo)（P/N：186009301）
取6 mL稀釋劑，加入內(nèi)標(biāo)（紅色樣品瓶）中，渦旋 混合10 s，濃度為250μM。
III. 儲(chǔ)存
收貨后請(qǐng)核對(duì)試劑盒清單。如果包裝被打開、損壞，內(nèi)容物缺失或超出有效期，請(qǐng)勿使用本產(chǎn)品（如果適用）。如需訂購替換試劑盒或部件，請(qǐng)聯(lián)系當(dāng)?shù)氐匿N售代表。訂購時(shí)請(qǐng)?zhí)峁┧璁a(chǎn)品的產(chǎn)品部件號(hào)和批號(hào)。
P/N | 說明 | 復(fù)溶后的儲(chǔ)存條件 | 初始儲(chǔ)存條件 |
186009299 | 氨基酸 食品飼料標(biāo)準(zhǔn)品 試劑盒 | 氨基酸食品和飼料標(biāo)準(zhǔn)品： -10℃~-25℃條件下存放至多60天。 氨基酸17種水解產(chǎn)物標(biāo)準(zhǔn)品： -10℃~-25℃條件下存放至多60天。 | 收貨后請(qǐng)冷凍保存于-10℃~-25℃。有效期限參見COA 報(bào)告(Certificate of Analysis)。 |
186009300 | 氨基酸 細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)品 試劑盒* | 氨基酸細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)品： -10℃~-25℃條件下存放至多60天。* 氨基酸17種水解產(chǎn)物標(biāo)準(zhǔn)品： -10℃~-25℃條件下存放至多60天。 | 收貨后請(qǐng)冷凍保存于-10℃~-25℃。有效期限參見COA報(bào)告(Certificate of Analysis)。 |
WAT088122 | 水解氨基酸 標(biāo)準(zhǔn)品 | N/A | 收貨后請(qǐng)冷凍保存于-10℃~-25℃。有效期限參見標(biāo)簽。 |
186009301 | 氨基酸內(nèi)標(biāo) - 正纈氨酸 | -10℃~-25℃條件下存放至多60天。 | 收貨后請(qǐng)冷凍保存于-10℃~-25℃。有效期限參見COA報(bào)告(Certificate of Analysis)。 |
*復(fù)溶后，細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒中的谷氨酰胺會(huì)隨時(shí)間推移降解。如果復(fù)溶后冷凍保存，產(chǎn)品標(biāo)示的谷氨酰胺濃度在最長15天內(nèi)有效。
